Salamat sa pagbisita sa Nature.com.Ang bersyon sa browser nga imong gigamit adunay limitado nga suporta sa CSS.Alang sa labing kaayo nga kasinatian, among girekomenda nga mogamit ka usa ka bag-ong browser (o i-disable ang Compatibility Mode sa Internet Explorer).Sa kasamtangan, aron masiguro ang padayon nga suporta, among ihatag ang site nga walay mga estilo ug JavaScript.
Ang epektibo nga mga photosensitizer labi ka hinungdanon alang sa kaylap nga klinikal nga paggamit sa phototherapy.Bisan pa, ang naandan nga mga photosensitizer sa kasagaran nag-antus gikan sa mubo nga wavelength nga pagsuyup, dili igo nga photostability, ubos nga quantum yield sa reactive oxygen species (ROS), ug aggregation-induced quenching sa ROS.Dinhi among gitaho ang usa ka duol-infrared (NIR) supramolecular photosensitizer (RuDA) nga gipataliwad-an sa kaugalingon nga pag-assemble sa Ru(II)-arene organometallic complexes sa tubigon nga solusyon.Ang RuDA makahimo lamang og singlet oxygen (1O2) sa aggregated state, ug kini nagpakita sa dayag nga aggregation-induced 1O2 generation nga kinaiya tungod sa usa ka mahinungdanon nga pagtaas sa proseso sa crossover tali sa singlet-triplet system.Ubos sa aksyon sa 808 nm laser light, ang RuDA nagpakita sa 1O2 quantum yield nga 16.4% (indocyanine green nga gi-aprobahan sa FDA: ΦΔ=0.2%) ug taas nga photothermal conversion efficiency nga 24.2% (commercial gold nanorods) nga adunay maayo kaayo nga photostability.: 21.0%, bulawan nga nanoshells: 13.0%).Dugang pa, ang mga RuDA-NP nga adunay maayo nga biocompatibility mahimong mas gusto nga matipon sa mga site sa tumor, hinungdan sa hinungdanon nga pagbag-o sa tumor sa panahon sa photodynamic therapy nga adunay 95.2% nga pagkunhod sa gidaghanon sa tumor sa vivo.Kini nga aggregation-enhancing photodynamic therapy naghatag usa ka estratehiya alang sa pagpalambo sa mga photosensitizer nga adunay paborable nga photophysical ug photochemical nga mga kabtangan.
Kung itandi sa naandan nga terapiya, ang photodynamic therapy (PDT) usa ka madanihon nga pagtambal alang sa kanser tungod sa hinungdanon nga mga bentaha sama sa tukma nga pagkontrol sa spatiotemporal, non-invasiveness, gipasagdan nga pagsukol sa droga, ug pagminus sa mga epekto nga 1,2,3.Ubos sa light irradiation, ang mga photosensitizer nga gigamit mahimong ma-activate aron maporma ang highly reactive oxygen species (ROS), nga mosangpot sa apoptosis/necrosis o immune responses4,5. Bisan pa, kadaghanan sa mga naandan nga photosensitizer, sama sa mga chlorin, porphyrin, ug anthraquinones, adunay medyo mubo nga wavelength nga pagsuyup (frequency <680 nm), sa ingon nagresulta sa dili maayo nga pagsulod sa kahayag tungod sa grabe nga pagsuyup sa biological nga mga molekula (pananglitan, hemoglobin ug melanin) sa ang makita nga rehiyon6,7. Bisan pa, kadaghanan sa mga naandan nga photosensitizer, sama sa mga chlorin, porphyrin, ug anthraquinones, adunay medyo mubo nga wavelength nga pagsuyup (frequency <680 nm), sa ingon nagresulta sa dili maayo nga pagsulod sa kahayag tungod sa grabe nga pagsuyup sa biological nga mga molekula (pananglitan, hemoglobin ug melanin) sa ang makita nga rehiyon6,7. Однако большинство обычных фотосенсибилизаторов, таких как хлорины, порфирины и антрахиноны, обладают относительно коротковолновым поглощением (частота < 680 нм), что приводит к плохому проникновению света из-за интенсивного поглощения биологических молекул (например, гемоглобина и меланина) в видимая область6,7. Bisan pa, ang kasagaran nga mga photosensitizer sama sa chlorins, porphyrins ug anthraquinones adunay medyo mubo nga wavelength nga pagsuyup (< 680 nm) nga miresulta sa dili maayo nga pagsulod sa kahayag tungod sa grabe nga pagsuyup sa biological nga mga molekula (eg hemoglobin ug melanin) ngadto sa makita nga rehiyon6,7..导致光穿透性差。.吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 HI导致光穿透性差。 Однако большинство традиционных фотосенсибилизаторов, таких как хлорины, порфирины и антрахиноны, имеют относительно коротковолновое поглощение (частота < 680 нм) из-за сильного поглощения биомолекул, таких как гемоглобин и меланин, что приводит к плохому проникновению света. Bisan pa, kadaghanan sa mga tradisyonal nga photosensitizer sama sa chlorins, porphyrins ug anthraquinones adunay medyo mubo nga wavelength nga pagsuyup (frequency <680 nm) tungod sa kusog nga pagsuyup sa mga biomolecules sama sa hemoglobin ug melanin nga nagresulta sa dili maayo nga pagsulod sa kahayag.Makita nga lugar 6.7.Busa, ang near-infrared (NIR) absorbing photosensitizers nga gi-activate sa 700-900 nm "therapeutic window" haum kaayo sa phototherapy.Tungod kay ang duol sa infrared nga kahayag mao ang pinakagamay nga masuhop sa biological nga mga tisyu, kini mahimong mosangpot sa mas lawom nga pagsulod ug dili kaayo photodamage8,9.
Ikasubo, ang kasamtangan nga NIR-absorbing photosensitizers kasagaran adunay dili maayo nga photostability, ubos nga singlet oxygen (1O2) nga kapasidad sa pagmugna, ug aggregation-induced 1O2 quenching, nga naglimite sa ilang clinical application10,11.Bisan kung gihimo ang daghang mga paningkamot aron mapaayo ang mga photophysical ug photochemical nga kabtangan sa naandan nga mga photosensitizer, hangtod karon daghang mga taho ang nagtaho nga ang mga photosensitizer nga nagsuhop sa NIR makasulbad sa tanan nga mga problema.Dugang pa, daghang mga photosensitizer ang nagpakita sa saad alang sa episyente nga henerasyon sa 1O212,13,14 kung gi-irradiated sa kahayag nga labaw sa 800 nm, tungod kay ang enerhiya sa photon paspas nga mikunhod sa duol sa IR nga rehiyon.Triphenylamine (TFA) isip usa ka electron donor ug [1,2,5] thiadiazole- [3,4-i] dipyrido [a, c] phenazine (TDP) isip usa ka electron acceptor group Donor-acceptor (DA) type nga tina sa usa ka klase sa mga tina , mosuhop sa duol-infrared, nga kaylap nga gitun-an alang sa duol-infrared bioimaging II ug photothermal therapy (PTT) tungod sa ilang pig-ot nga bandgap.Busa, ang DA-type nga mga tina mahimong gamiton alang sa PDT nga adunay duol nga IR nga eksaytasyon, bisan tuod kini panagsa ra nga gitun-an isip mga photosensitizer alang sa PDT.
Nahibal-an kaayo nga ang taas nga kahusayan sa intersystem crossing (ISC) sa mga photosensitizer nagpasiugda sa pagporma sa 1O2.Usa ka sagad nga estratehiya alang sa pagpauswag sa proseso sa ISC mao ang pagpauswag sa spin-orbit coupling (SOC) sa mga photosensitizer pinaagi sa pagpaila sa bug-at nga mga atomo o espesyal nga mga organikong bahin.Bisan pa, kini nga pamaagi adunay pipila nga mga kakulangan ug mga limitasyon19,20.Bag-ohay lang, ang supramolecular self-assembly naghatag ug bottom-up intelihente nga pamaagi alang sa paggama sa mga functional nga materyales sa lebel sa molekula,21,22 nga adunay daghang mga bentaha sa phototherapy: (1) ang self-assembled photosensitizers mahimong adunay potensyal sa pagporma sa ribbon structures.Susama sa mga elektronik nga istruktura nga adunay mas dasok nga pag-apod-apod sa lebel sa enerhiya tungod sa nagsapaw nga mga orbit taliwala sa mga bloke sa pagtukod.Busa, ang pagpares sa enerhiya tali sa ubos nga singlet excited state (S1) ug sa silingang triplet excited state (Tn) mapauswag, nga mapuslanon alang sa proseso sa ISC 23, 24.(2) Ang supramolecular assembly makapakunhod sa non-radiative relaxation base sa intramolecular motion limitation mechanism (RIM), nga nagpasiugda usab sa proseso sa ISC 25, 26.(3) Ang supramolecular nga asembliya makapanalipod sa sulod nga mga molekula sa monomer gikan sa oksihenasyon ug pagkadaot, sa ingon makapauswag pag-ayo sa photostability sa photosensitizer.Tungod sa mga bentaha sa ibabaw, kami nagtuo nga ang mga supramolecular photosensitizer nga sistema mahimong usa ka maayong alternatibo aron mabuntog ang mga kakulangan sa PDT.
Ang mga komplikado nga nakabase sa Ru(II) usa ka maayong plataporma sa medikal alang sa mga potensyal nga aplikasyon sa pagdayagnos ug terapiya sa mga sakit tungod sa ilang talagsaon ug madanihon nga biological nga mga kabtangan28,29,30,31,32,33,34.Dugang pa, ang kadagaya sa excited states ug ang tunable photophysicochemical properties sa Ru(II)-based complexes naghatag ug dakong bentaha alang sa pagpalambo sa Ru(II)-based photosensitizers35,36,37,38,39,40.Usa ka talagsaong pananglitan mao ang ruthenium(II) polypyridyl complex TLD-1433, nga sa pagkakaron anaa sa Phase II clinical trials isip photosensitizer alang sa pagtambal sa non-muscle invasive bladder cancer (NMIBC)41.Dugang pa, ang ruthenium(II)arene organometallic complex kay kaylap nga gigamit isip chemotherapeutic agents alang sa cancer treatment tungod sa ilang ubos nga toxicity ug kasayon sa pag-usab42,43,44,45.Ang mga ionic nga kabtangan sa Ru (II) -arene organometallic complexes dili lamang makapauswag sa dili maayo nga solubility sa DA chromophores sa komon nga solvents, apan makapauswag usab sa asembliya sa DA chromophores.Dugang pa, ang pseudooctahedral half-sandwich nga istruktura sa organometallic complexes sa Ru(II) -arenes makapugong sa H-aggregation sa DA-type chromophores, sa ingon mapadali ang pagporma sa J-aggregation nga adunay redshifted absorption bands.Apan, ang kinaiyanhon nga mga disbentaha sa Ru(II) -arene complexes, sama sa ubos nga kalig-on ug/o dili maayo nga bioavailability, makaapekto sa therapeutic efficacy ug in vivo nga kalihokan sa arene-Ru(II) complexes.Bisan pa, gipakita sa mga pagtuon nga kini nga mga kakulangan mahimong mabuntog pinaagi sa pag-encapsulate sa mga ruthenium complex nga adunay biocompatible polymers pinaagi sa pisikal nga encapsulation o covalent conjugation.
Niini nga trabaho, among gitaho ang DA-conjugated complexes sa Ru (II) -arene (RuDA) nga adunay NIR trigger pinaagi sa usa ka coordination bond tali sa DAD chromophore ug sa Ru (II) -arene moiety.Ang resulta nga mga komplikado mahimong mag-ipon sa kaugalingon ngadto sa metalosupramolecular vesicles sa tubig tungod sa non-covalent interactions.Ilabi na, ang supramolecular nga asembliya naghatag sa RuDA sa polymerization-induced intersystem crossing-over nga mga kabtangan, nga nagpadako sa pagkaayo sa ISC, nga pabor kaayo alang sa PDT (Fig. 1A).Aron madugangan ang akumulasyon sa tumor ug sa biocompatibility sa vivo, ang Pluronic F127 (PEO-PPO-PEO) nga gi-aprobahan sa FDA gigamit sa pag-encapsulate sa RuDA47,48,49 aron makamugna ang RuDA-NP nanoparticle (Figure 1B) nga naglihok isip usa ka episyente kaayo nga PDT / Dual- mode nga PTT proxy.Sa phototherapy sa kanser (Figure 1C), gigamit ang RuDA-NP sa pagtratar sa hubo nga mga ilaga nga adunay mga tumor sa MDA-MB-231 aron tun-an ang pagka-epektibo sa PDT ug PTT sa vivo.
Schematic nga ilustrasyon sa photophysical nga mekanismo sa RuDA sa monomeric ug aggregated nga mga porma alang sa cancer phototherapy, synthesis sa B RuDA-NPs ug C RuDA-NPs alang sa NIR-activated PDT ug PTT.
Ang RuDA, nga naglangkob sa TPA ug TDP functionality, giandam sumala sa pamaagi nga gipakita sa Supplementary Figure 1 (Figure 2A), ug ang RuDA gihulagway sa 1H ug 13C NMR spectra, electrospray ionization mass spectrometry, ug elemental analysis (Supplementary Figures 2-4). ).Ang RuDA electron density difference map sa pinakaubos nga singlet transition gikuwenta sa time-dependent density functional theory (TD-DFT) aron tun-an ang proseso sa pagbalhin sa bayad.Ingon sa gipakita sa Supplementary Figure 5, ang electron density drifts nag-una gikan sa triphenylamine ngadto sa TDP acceptor unit human sa photoexcitation, nga mahimong ikapasangil sa usa ka tipikal nga intramolecular charge transfer (CT) nga transisyon.
Kemikal nga istruktura sa Ore B Pagsuyop spectra sa Ore sa mga sagol sa lain-laing mga ratios sa DMF ug tubig.C Na-normalize nga mga kantidad sa pagsuyup sa RuDA (800 nm) ug ICG (779 nm) kumpara sa oras sa 0.5 W cm-2 sa 808 nm laser light.D Ang photodegradation sa ABDA gipakita pinaagi sa RuDA-induced formation sa 1O2 sa DMF/H2O mixtures uban sa lain-laing mga sulod sa tubig ubos sa aksyon sa laser radiation uban sa usa ka wavelength sa 808 nm ug sa usa ka gahum sa 0.5 W/cm2.
Abstract—Ang UV-visible absorption spectroscopy gigamit sa pagtuon sa self-assembly properties sa Ore sa mga panagsagol sa DMF ug tubig sa lain-laing ratios.Ingon sa gipakita sa fig.2B, RuDA nagpakita sa pagsuyup bands gikan sa 600 ngadto sa 900 nm sa DMF uban sa usa ka maximum pagsuyup band sa 729 nm.Ang pagdugang sa gidaghanon sa tubig nagdala ngadto sa usa ka hinay-hinay nga pula nga pagbalhin sa Ore pagsuyup maximum ngadto sa 800 nm, nga nagpakita sa J-aggregation sa Ore sa assembled nga sistema.Ang photoluminescence spectra sa RuDA sa lain-laing mga solvents gipakita sa Supplementary Figure 6. RuDA nagpakita sa pagpakita sa tipikal nga NIR-II luminescence uban sa usa ka maximum emission wavelength sa ca.1050 nm sa CH2Cl2 ug CH3OH, matag usa.Ang dako nga pagbalhin sa Stokes (mga 300 nm) sa RuDA nagpakita sa usa ka mahinungdanon nga pagbag-o sa geometry sa naghinam-hinam nga estado ug sa pagporma sa ubos nga kusog nga excited nga mga estado.Ang luminescence quantum yield sa Ore sa CH2Cl2 ug CH3OH gitino nga 3.3 ug 0.6%, matag usa.Bisan pa, sa usa ka sinagol nga methanol ug tubig (5/95, v/v), usa ka gamay nga redshift sa emission ug usa ka pagkunhod sa quantum yield (0.22%) naobserbahan, nga mahimong tungod sa self-assembly sa Ore .
Aron mahanduraw ang self-assembly sa ORE, gigamit namo ang liquid atomic force microscopy (AFM) aron mahanduraw ang mga kausaban sa morphological sa ORE sa methanol solution human sa pagdugang ug tubig.Kung ang sulud sa tubig ubos sa 80%, wala’y nakita nga tin-aw nga panagsama (Supplementary Fig. 7).Bisan pa, sa dugang nga pagtaas sa sulud sa tubig sa 90-95%, nagpakita ang gagmay nga mga nanoparticle, nga nagpakita sa kaugalingon nga pag-assemble sa Ore. solusyon (Fig. 2C ug Supplementary Fig. 8).Sa kasukwahi, ang pagsuyop sa indocyanine green (ICG isip kontrol) paspas nga nahulog sa 779 nm, nga nagpakita sa maayo kaayo nga photostability sa RuDA.Dugang pa, ang kalig-on sa RuDA-NPs sa PBS (pH = 5.4, 7.4 ug 9.0), 10% FBS ug DMEM (taas nga glucose) gisusi sa UV-visible absorption spectroscopy sa lainlaing mga punto sa oras.Sama sa gipakita sa Supplementary Figure 9, ang gamay nga pagbag-o sa RuDA-NP absorption bands nakita sa PBS sa pH 7.4 / 9.0, FBS ug DMEM, nga nagpakita sa maayo kaayo nga kalig-on sa RuDA-NP.Bisan pa, sa usa ka acidic medium (рН = 5.4) nakit-an ang hydrolysis sa Ore.Gisusi usab namo ang kalig-on sa RuDA ug RuDA-NP gamit ang high performance liquid chromatography (HPLC) nga mga pamaagi.Ingon sa gipakita sa Supplementary Figure 10, ang RuDA lig-on sa usa ka sinagol nga methanol ug tubig (50/50, v / v) sa unang oras, ug ang hydrolysis naobserbahan human sa 4 ka oras.Bisan pa, usa ra ka lapad nga concave-convex nga taluktok ang naobserbahan alang sa RuDA NPs.Busa, ang gel permeation chromatography (GPC) gigamit aron masusi ang kalig-on sa RuDA NPs sa PBS (pH = 7.4).Sama sa gipakita sa Supplementary Figure 11, human sa 8 ka oras nga paglumlum ubos sa nasulayan nga mga kondisyon, ang peak height, peak width ug peak area sa NP RuDA wala kaayo mausab, nga nagpakita sa maayo kaayo nga kalig-on sa NP RuDA.Dugang pa, ang mga hulagway sa TEM nagpakita nga ang morphology sa RuDA-NP nanoparticle nagpabilin nga halos wala mausab human sa 24 ka oras sa lasaw nga PBS buffer (pH = 7.4, Supplementary Fig. 12).
Tungod kay ang self-assembly makahatag ug lain-laing functional ug chemical nga kinaiya sa Ore, among naobserbahan ang pagpagawas sa 9,10-anthracenediylbis(methylene)dimalonic acid (ABDA, indicator 1O2) sa methanol-water mixtures.Ore nga lainlain ang sulod sa tubig50.Sama sa gipakita sa Figure 2D ug Supplementary Figure 13, walay degradation sa ABDA ang naobserbahan kung ang sulod sa tubig ubos sa 20%.Uban sa pagtaas sa humidity ngadto sa 40%, ang ABDA degradation nahitabo, ingon nga ebidensya sa usa ka pagkunhod sa intensity sa ABDA fluorescence.Naobserbahan usab nga ang mas taas nga sulod sa tubig moresulta sa mas paspas nga pagkadaot, nga nagsugyot nga ang RuDA self-assembly gikinahanglan ug mapuslanon alang sa ABDA degradation.Kini nga panghitabo lahi kaayo sa modernong ACQ (aggregation-induced quenching) chromophores.Kung gi-irradiated sa usa ka laser nga adunay wavelength nga 808 nm, ang quantum yield sa 1O2 RuDA sa usa ka sinagol nga 98% H2O/2% DMF mao ang 16.4%, nga 82 ka beses nga mas taas kaysa sa ICG (ΦΔ = 0.2%)51, nga nagpakita sa usa ka talagsaon nga henerasyon efficiency 1O2 RuDA sa kahimtang sa aggregation.
Ang electron spins gamit ang 2,2,6,6-tetramethyl-4-piperidinone (TEMP) ug 5,5-dimethyl-1-pyrroline N-oxide (DMPO) isip spin traps Resonance spectroscopy (ESR) gigamit sa pag-ila sa resulta nga mga espisye AFK.pinaagi sa RuDA.Sama sa gipakita sa Supplementary Figure 14, gipamatud-an nga ang 1O2 namugna sa mga oras sa irradiation tali sa 0 ug 4 ka minuto.Dugang pa, sa dihang ang RuDA gilumlom sa DMPO ubos sa irradiation, usa ka tipikal nga upat ka linya nga EPR signal sa 1: 2: 2: 1 DMPO-OH· adduct ang nakita, nga nagpakita sa pagporma sa hydroxyl radicals (OH·).Sa kinatibuk-an, ang mga resulta sa ibabaw nagpakita sa abilidad sa RuDA sa pagpukaw sa produksyon sa ROS pinaagi sa usa ka dual type I/II photosensitization nga proseso.
Aron mas masabtan ang elektronik nga mga kabtangan sa RuDA sa monomeric ug aggregated nga mga porma, ang frontier molecular orbitals sa RuDA sa monomeric ug dimeric nga mga porma gikalkulo gamit ang DFT nga pamaagi.Ingon sa gipakita sa fig.3A, ang pinakataas nga okupado nga molecular orbital (HOMO) sa monomeric nga RuDA gi-delocalize sa ligid nga backbone ug ang pinakaubos nga wala'y trabaho nga molecular orbital (LUMO) nasentro sa TDP acceptor unit.Sa kasukwahi, ang densidad sa electron sa dimeric HOMO gikonsentrar sa ligand sa usa ka molekula sa RuDA, samtang ang densidad sa elektron sa LUMO nag-una nga gikonsentrar sa unit sa acceptor sa laing molekula sa RuDA, nga nagpakita nga ang RuDA anaa sa dimer.Mga bahin sa CT.
A Ang HOMO ug LUMO sa Ore gikalkulo sa monomeric ug dimeric nga porma.B Singlet ug triplet nga lebel sa enerhiya sa Ore sa mga monomer ug dimer.C Gibanabana nga lebel sa RuDA ug posible nga mga channel sa ISC isip monomeric C ug dimeric D. Ang mga arrow nagpakita sa posible nga mga channel sa ISC.
Ang pag-apod-apod sa mga electron ug mga lungag sa ubos nga kusog nga singlet nga excited nga mga estado sa RuDA sa monomeric ug dimeric nga mga porma gisusi gamit ang Multiwfn 3.852.53 software, nga gikalkulo gamit ang TD-DFT nga pamaagi.Ingon sa gipakita sa dugang nga label.Sama sa gipakita sa Figures 1-2, ang mga monomeric RDA hole kasagarang gi-delocalize sa ligid nga backbone niining singlet excited states, samtang ang mga electron kasagaran nahimutang sa TDP group, nga nagpakita sa intramolecular nga mga kinaiya sa CT.Dugang pa, alang niining mga singlet nga excited nga mga estado, adunay mas daghan o dili kaayo nagsapaw sa taliwala sa mga lungag ug mga electron, nga nagsugyot nga kini nga mga singlet nga excited nga mga estado naghimo ug pipila ka kontribusyon gikan sa lokal nga eksaytasyon (LE).Alang sa mga dimer, dugang sa intramolecular CT ug LE nga mga bahin, usa ka piho nga proporsyon sa intermolecular CT nga mga bahin ang nakita sa tagsa-tagsa nga mga estado, ilabi na ang S3, S4, S7, ug S8, base sa intermolecular CT analysis, uban sa CT intermolecular transition isip mga nag-unang (Supplementary Table).3).
Aron mas masabtan ang mga resulta sa eksperimento, dugang namon nga gisusi ang mga kabtangan sa RuDA nga naghinam-hinam nga mga estado aron mahibal-an ang mga kalainan tali sa mga monomer ug dimer (Supplementary Tables 4-5).Ingon sa gipakita sa Figure 3B, ang lebel sa enerhiya sa singlet ug triplet nga excited nga estado sa dimer mas dasok kaysa sa monomer, nga makatabang sa pagpakunhod sa gintang sa enerhiya tali sa S1 ug Tn. Gikataho nga ang mga pagbalhin sa ISC mahimong matuman sulod sa gamay nga gintang sa enerhiya (ΔES1-Tn <0.3 eV) tali sa S1 ug Tn54. Gikataho nga ang mga pagbalhin sa ISC mahimong matuman sulod sa gamay nga gintang sa enerhiya (ΔES1-Tn <0.3 eV) tali sa S1 ug Tn54. Сообщалось, что переходы ISC могут быть реализованы в пределах небольшой энергетической щели (ΔES1-Tn <0,3 эду) S. Gikataho nga ang mga pagbalhin sa ISC mahimong matuman sulod sa gamay nga gintang sa enerhiya (ΔES1-Tn <0.3 eV) tali sa S1 ug Tn54.据报道，ISC 跃迁可以在S1 和Tn54 之间的小能隙（ΔES1-Tn < 0.3 eV）内实现。据报道，ISC 跃迁可以在S1 和Tn54 之间的小能隙（ΔES1-Tn < 0.3 eV）内实现。 Сообщалось, что переход ISC может быть реализован в пределах небольшой энергетической щели (ΔES1-Tn < 0,3 эВ) S4 м Gikataho nga ang transisyon sa ISC mahimong matuman sulod sa gamay nga gintang sa enerhiya (ΔES1-Tn <0.3 eV) tali sa S1 ug Tn54.Dugang pa, usa lang ka orbital, okupado o wala, kinahanglan magkalainlain sa gigapos nga singlet ug triplet nga mga estado aron mahatagan ang usa ka non-zero SOC integral.Busa, base sa pag-analisa sa enerhiya sa paghinam-hinam ug sa transisyon sa orbital, ang tanan nga posible nga mga kanal sa transisyon sa ISC gipakita sa Fig.3C,D.Ilabi na, usa lamang ka channel sa ISC ang anaa sa monomer, samtang ang dimeric nga porma adunay upat ka mga channel sa ISC nga makapauswag sa transisyon sa ISC.Busa, makatarunganon nga hunahunaon nga ang labi nga mga molekula sa RuDA natipon, labi ka dali nga magamit ang mga agianan sa ISC.Busa, ang mga aggregate sa RuDA mahimong magporma og two-band electronic structures sa singlet ug triplet states, nga makapakunhod sa energy gap tali sa S1 ug anaa Tn, sa ingon nagdugang sa efficiency sa ISC aron mapadali ang 1O2 generation.
Aron sa dugang nga pagpatin-aw sa nagpahiping mekanismo, gi-synthesize namo ang usa ka reference compound sa arene-Ru (II) complex (RuET) pinaagi sa pag-ilis sa duha ka ethyl groups nga adunay duha ka triphenylamine phenyl nga mga grupo sa RuDA (Fig. 4A, alang sa hingpit nga kinaiya, tan-awa ang ESI, Supplementary 15 -21 ) Gikan sa donor (diethylamine) ngadto sa acceptor (TDF), ang RuET adunay parehas nga intramolecular CT nga mga kinaiya sama sa RuDA.Sama sa gipaabot, ang pagsuyup nga spectrum sa RuET sa DMF nagpakita sa usa ka ubos nga energy charge transfer band nga adunay kusog nga pagsuyup sa duol nga infrared nga rehiyon sa rehiyon nga 600-1100 nm (Fig. 4B).Dugang pa, ang RuET aggregation naobserbahan usab sa pagdugang sa sulod sa tubig, nga gipakita sa redshift sa maximum absorption, nga dugang nga gikumpirma sa liquid AFM imaging (Supplementary Fig. 22).Gipakita sa mga resulta nga ang RuET, sama sa RuDA, mahimo’g maporma ang mga estado sa intramolecular ug mag-ipon sa kaugalingon sa mga aggregated nga istruktura.
Kemikal nga istruktura sa RuET.B Absorption spectra sa RuET sa mga panagsagol sa lain-laing ratios sa DMF ug tubig.Mga laraw sa C EIS Nyquist para sa RuDA ug RuET.Ang mga tubag sa photocurrent D sa RuDA ug RuET ubos sa aksyon sa laser radiation nga adunay wavelength nga 808 nm.
Ang photodegradation sa ABDA sa presensya sa RuET gisusi pinaagi sa irradiation sa usa ka laser nga adunay wavelength nga 808 nm.Katingad-an, walay pagkadaot sa ABDA ang naobserbahan sa lainlaing mga tipik sa tubig (Supplementary Fig. 23).Ang usa ka posible nga rason mao nga ang RuET dili makahimo sa usa ka banded electronic structure tungod kay ang ethyl chain wala magpasiugda sa episyente nga intermolecular charge transfer.Busa, ang electrochemical impedance spectroscopy (EIS) ug transient photocurrent measurements gihimo aron itandi ang photoelectrochemical properties sa RuDA ug RuET.Sumala sa laraw sa Nyquist (Figure 4C), ang RuDA nagpakita sa usa ka labi ka gamay nga radius kaysa sa RuET, nga nagpasabut nga ang RuDA56 adunay mas paspas nga intermolecular electron transport ug mas maayo nga conductivity.Dugang pa, ang photocurrent density sa RuDA mas taas kay sa RuET (Fig. 4D), nga nagpamatuod sa mas maayo nga charge transfer efficiency sa RuDA57.Busa, ang phenyl nga grupo sa triphenylamine sa Ore adunay importante nga papel sa paghatag sa intermolecular charge transfer ug pagporma sa usa ka banded electronic structure.
Aron madugangan ang pagtipon sa tumor ug ang biocompatibility sa vivo, dugang namon nga gilakip ang RuDA nga adunay F127.Ang kasagaran nga hydrodynamic diameter sa RuDA-NPs determinado nga 123.1 nm nga adunay pig-ot nga pag-apod-apod (PDI = 0.089) gamit ang dynamic light scattering (DLS) nga pamaagi (Figure 5A), nga nagpasiugda sa pagtipon sa tumor pinaagi sa pagdugang sa permeability ug retention.EPR) nga epekto.Gipakita sa mga imahe sa TEM nga ang Ore NPs adunay managsama nga spherical nga porma nga adunay average nga diameter nga 86 nm.Ilabi na, ang maximum nga pagsuyup sa RuDA-NPs nagpakita sa 800 nm (Supplementary Fig. 24), nga nagpakita nga ang RuDA-NPs mahimong magpabilin sa mga gimbuhaton ug mga kabtangan sa self-assembling RuDAs.Ang kalkulado nga ROS quantum yield alang sa NP Ore mao ang 15.9%, nga ikatandi sa Ore.Ang mga photothermal nga kabtangan sa RuDA NPs gitun-an ubos sa aksyon sa laser radiation nga adunay wavelength nga 808 nm gamit ang infrared camera.Ingon sa gipakita sa fig.5B,C, ang kontrol nga grupo (PBS lamang) nakasinati og gamay nga pagtaas sa temperatura, samtang ang temperatura sa solusyon sa RuDA-NPs paspas nga misaka sa pagtaas sa temperatura (ΔT) ngadto sa 15.5, 26.1, ug 43.0 °C.Ang taas nga konsentrasyon mao ang 25, 50, ug 100 µM, matag usa, nga nagpakita sa usa ka kusog nga photothermal nga epekto sa RuDA NPs.Dugang pa, ang mga pagsukod sa pagpainit / pagpabugnaw gikuha aron masusi ang kalig-on sa photothermal sa RuDA-NP ug itandi sa ICG.Ang temperatura sa Ore NPs wala mokunhod human sa lima ka heating/cooling cycles (Fig. 5D), nga nagpakita sa maayo kaayong photothermal stability sa Ore NPs.Sa kasukwahi, ang ICG nagpakita sa ubos nga photothermal nga kalig-on sama sa makita gikan sa dayag nga pagkahanaw sa photothermal temperature plateau ubos sa samang kondisyon.Sumala sa miaging method58, ang photothermal conversion efficiency (PCE) sa RuDA-NP gikalkulo isip 24.2%, nga mas taas kay sa kasamtangan nga photothermal nga mga materyales sama sa gold nanorods (21.0%) ug gold nanoshells (13.0%)59 .Sa ingon, ang NP Ore nagpakita sa maayo kaayo nga mga kabtangan sa photothermal, nga naghimo kanila nga nagsaad nga mga ahente sa PTT.
Pag-analisar sa DLS ug TEM nga mga hulagway sa RuDA NPs (inset).B Thermal nga mga hulagway sa nagkalain-laing konsentrasyon sa RuDA NPs nga naladlad sa laser radiation sa wavelength nga 808 nm (0.5 W cm-2).C Photothermal conversion curves sa nagkalain-laing konsentrasyon sa ore NPs, nga quantitative data.B. D Pagtaas sa temperatura sa ORE NP ug ICG sa 5 ka heating-cooling cycles.
Ang photocytotoxicity sa RuDA NPs batok sa MDA-MB-231 nga mga selula sa kanser sa suso sa tawo gisusi sa vitro.Ingon sa gipakita sa fig.Ang 6A, B, RuDA-NPs ug RuDA nagpakita sa gipasagdan nga cytotoxicity sa pagkawala sa irradiation, nga nagpasabot sa ubos nga dark toxicity sa RuDA-NPs ug RuDA.Bisan pa, pagkahuman sa pagkaladlad sa radiation sa laser sa usa ka wavelength nga 808 nm, ang RuDA ug RuDA NPs nagpakita sa kusog nga photocytotoxicity batok sa mga selula sa kanser sa MDA-MB-231 nga adunay mga kantidad sa IC50 (katunga sa labing taas nga konsentrasyon sa pagpugong) nga 5.4 ug 9.4 μM, matag usa, nagpakita. nga ang RuDA-NP ug RuDA adunay potensyal alang sa phototherapy sa kanser.Dugang pa, ang photocytotoxicity sa RuDA-NP ug RuDA dugang nga gisusi sa presensya sa bitamina C (Vc), usa ka ROS scavenger, aron sa pagpatin-aw sa papel sa ROS sa light-induced cytotoxicity.Dayag nga, ang cell viability misaka human sa pagdugang sa Vc, ug ang IC50 nga mga kantidad sa RuDA ug RuDA NPs mao ang 25.7 ug 40.0 μM, matag usa, nga nagpamatuod sa importante nga papel sa ROS sa photocytotoxicity sa RuDA ug RuDA NPs.Ang light-induced cytotoxicity sa RuDA-NPs ug RuDA sa MDA-MB-231 cancer cells pinaagi sa live/dead cell staining gamit ang calcein AM (green fluorescence para sa live cells) ug propidium iodide (PI, red fluorescence para sa dead cells).gikumpirma sa mga selula) isip fluorescent probes.Sama sa gipakita sa Figure 6C, ang mga selula nga gitambalan sa RuDA-NP o RuDA nagpabilin nga mabuhi nga walay irradiation, ingon nga ebidensya sa grabe nga berde nga fluorescence.Sa kasukwahi, ubos sa laser irradiation, ang red fluorescence lamang ang nakita, nga nagpamatuod sa epektibo nga photocytotoxicity sa RuDA o RuDA NPs.Mamatikdan nga ang berde nga fluorescence nagpakita sa pagdugang sa Vc, nga nagpaila sa usa ka paglapas sa photocytotoxicity sa RuDA ug RuDA NPs.Kini nga mga resulta nahiuyon sa in vitro photocytotoxicity assays.
Dose-dependent viability sa A RuDA- ug B RuDA-NP cells sa MDA-MB-231 cells sa presensya o pagkawala sa Vc (0.5 mM), matag usa.Error bars, mean ± standard deviation (n = 3). Wala gipares, duha ka kilid nga t nga pagsulay *p <0.05, **p <0.01, ug ***p <0.001. Wala gipares, duha ka kilid nga t nga pagsulay *p <0.05, **p <0.01, ug ***p <0.001. Непарные двусторонние t-критерии *p <0,05, **p <0,01 ug ***p <0,001. Wala gipares nga two-tailed t-tests *p<0.05, **p<0.01, ug ***p<0.001.未配对的双边t 检验*p < 0.05、**p < 0.01 和***p < 0.001。未配对的双边t 检验*p < 0.05、**p < 0.01 和***p < 0.001。 Непарные двусторонние t-тесты *p <0,05, **p <0,01 ug ***p <0,001. Wala gipares nga two-tailed t-tests *p<0.05, **p<0.01, ug ***p<0.001.C Live/dead cell staining analysis gamit ang calcein AM ug propidium iodide isip fluorescent probes.Scale bar: 30 µm.Ang mga representatibo nga mga hulagway sa tulo ka biolohikal nga pagbalik gikan sa matag grupo gipakita.D Confocal fluorescence nga mga hulagway sa produksiyon sa ROS sa MDA-MB-231 nga mga selula ubos sa lainlaing kondisyon sa pagtambal.Green DCF fluorescence nagpakita sa presensya sa ROS.Pag-irradiate sa laser nga adunay wavelength nga 808 nm nga adunay gahum nga 0.5 W/cm2 sulod sa 10 minutos (300 J/cm2).Scale bar: 30 µm.Ang mga representatibo nga mga hulagway sa tulo ka biolohikal nga pagbalik gikan sa matag grupo gipakita.E Flow cytometry RuDA-NPs (50 µM) o RuDA (50 µM) pagtuki sa pagtambal nga adunay o walay 808 nm laser (0.5 W cm-2) sa presensya ug pagkawala sa Vc (0.5 mM) sulod sa 10 min.Ang mga representatibo nga mga hulagway sa tulo ka biolohikal nga pagbalik gikan sa matag grupo gipakita.F Nrf-2, HSP70 ug HO-1 sa MDA-MB-231 nga mga selula nga gitambalan sa RuDA-NPs (50 µM) nga adunay o walay 808 nm laser irradiation (0.5 W cm-2, 10 min, 300 J cm-2), mga selula nga nagpahayag 2).Ang mga representatibo nga mga hulagway sa duha ka biolohikal nga pagbalik gikan sa matag grupo gipakita.
Ang produksyon sa intracellular ROS sa MDA-MB-231 nga mga selula gisusi gamit ang 2,7-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFH-DA) nga pamaagi sa pag-staining.Ingon sa gipakita sa fig.6D, ang mga selyula nga gitambalan sa RuDA-NPs o RuDA nagpakita sa lahi nga berde nga fluorescence sa dihang gi-irradiated sa 808 nm laser, nga nagpakita nga ang RuDA-NPs ug RuDA adunay episyente nga abilidad sa pagmugna og ROS.Sa kasukwahi, sa pagkawala sa kahayag o sa presensya sa Vc, usa lamang ka huyang nga fluorescent signal sa mga selula ang naobserbahan, nga nagpakita sa usa ka gamay nga pagporma sa ROS.Ang mga lebel sa intracellular ROS sa mga selula sa RuDA-NP ug mga selula nga MDA-MB-231 nga gitambalan sa RuDA dugang nga gitino pinaagi sa flow cytometry.Sama sa gipakita sa Supplementary Figure 25, ang mean fluorescence intensity (MFI) nga namugna sa RuDA-NPs ug RuDA ubos sa 808 nm laser irradiation dako kaayo nga nadugangan sa mga 5.1 ug 4.8 nga mga panahon, matag usa, kon itandi sa control group, nga nagpamatuod sa ilang maayo kaayo nga pagporma AFK.kapasidad.Bisan pa, ang mga lebel sa intracellular ROS sa RuDA-NP o MDA-MB-231 nga mga selula nga gitambalan sa RuDA ikatandi lamang sa mga kontrol nga walay laser irradiation o sa presensya sa Vc, susama sa mga resulta sa confocal fluorescence analysis.
Gipakita nga ang mitochondria mao ang panguna nga target sa Ru (II) -arene complexes60.Busa, ang subcellular localization sa RuDA ug RuDA-NPs gisusi.Sama sa gipakita sa Supplementary Figure 26, RuDA ug RuDA-NP nagpakita sa susama nga cellular distribution profiles nga adunay pinakataas nga akumulasyon sa mitochondria (62.5 ± 4.3 ug 60.4 ± 3.6 ng / mg nga protina, matag usa).Bisan pa, gamay ra nga kantidad sa Ru ang nakit-an sa nukleyar nga mga tipik sa Ore ug NP Ore (3.5 ug 2.1%, matag usa).Ang nahabilin nga cell fraction adunay nahabilin nga ruthenium: 31.7% (30.6 ± 3.4 ng / mg nga protina) alang sa RuDA ug 42.9% (47.2 ± 4.5 ng / mg nga protina) alang sa RuDA-NPs.Sa kinatibuk-an, ang Ore ug NP Ore kasagarang natipon sa mitochondria.Aron masusi ang mitochondrial dysfunction, gigamit namo ang JC-1 ug MitoSOX Red staining aron masusi ang potensyal sa mitochondrial membrane ug kapasidad sa produksiyon sa superoxide, matag usa.Sama sa gipakita sa Supplementary Fig. 27, ang grabe nga berde (JC-1) ug pula (MitoSOX Red) nga fluorescence naobserbahan sa mga selula nga gitambalan sa RuDA ug RuDA-NPs ubos sa 808 nm laser irradiation, nga nagpakita nga ang RuDA ug RuDA-NPs highly fluorescent Kini epektibo nga makaaghat sa mitochondrial membrane depolarization ug superoxide production.Dugang pa, ang mekanismo sa pagkamatay sa selula gitino gamit ang flow cytometry based analysis sa annexin V-FITC/propidium iodide (PI).Sama sa gipakita sa Figure 6E, kung gi-irradiated sa 808 nm laser, ang RuDA ug RuDA-NP nag-aghat sa usa ka mahinungdanong pagtaas sa sayo nga apoptosis rate (ubos nga tuo nga quadrant) sa MDA-MB-231 nga mga selula kumpara sa PBS o PBS plus laser.giproseso nga mga selula.Apan, sa dihang gidugang ang Vc, ang apoptosis rate sa RuDA ug RuDA-NP mikunhod pag-ayo gikan sa 50.9% ug 52.0% ngadto sa 15.8% ug 17.8%, matag usa, nga nagpamatuod sa importante nga papel sa ROS sa photocytotoxicity sa RuDA ug RuDA-NP..Dugang pa, ang gamay nga necrotic nga mga selula naobserbahan sa tanan nga mga grupo nga gisulayan (ibabaw nga wala nga quadrant), nga nagsugyot nga ang apoptosis mahimo’g ang panguna nga porma sa pagkamatay sa cell nga gipahinabo sa RuDA ug RuDA-NPs.
Tungod kay ang kadaot sa stress sa oxidative usa ka mayor nga determinant sa apoptosis, ang nukleyar nga butang nga nalangkit sa erythroid 2, factor 2 (Nrf2) 62, usa ka importante nga regulator sa antioxidant system, gisusi sa RuDA-NPs-treated MDA-MB-231.Mekanismo sa paglihok sa RuDA NPs nga gipahinabo sa irradiation.Sa samang higayon, ang ekspresyon sa downstream nga protina heme oxygenase 1 (HO-1) nakita usab.Sama sa gipakita sa Figure 6F ug Supplementary Figure 29, ang RuDA-NP-mediated phototherapy nagdugang sa Nrf2 ug HO-1 nga lebel sa ekspresyon kumpara sa PBS nga grupo, nga nagpakita nga ang RuDA-NPs mahimong makapukaw sa oxidative stress signaling pathways.Dugang pa, aron tun-an ang photothermal nga epekto sa RuDA-NPs63, ang ekspresyon sa heat shock protein Hsp70 gisusi usab.Tin-aw nga ang mga selula nga gitambalan sa RuDA-NPs + 808 nm laser irradiation nagpakita sa dugang nga ekspresyon sa Hsp70 kumpara sa laing duha ka grupo, nga nagpakita sa usa ka cellular nga tubag sa hyperthermia.
Ang talagsaon nga mga resulta sa in vitro nag-aghat kanamo sa pag-imbestigar sa in vivo nga pasundayag sa RuDA-NP sa hubo nga mga ilaga nga adunay MDA-MB-231 nga mga tumor.Ang pag-apod-apod sa tisyu sa RuDA NPs gitun-an pinaagi sa pagtino sa sulod sa ruthenium sa atay, kasingkasing, spleen, kidney, baga, ug mga tumor.Ingon sa gipakita sa fig.7A, ang labing kadaghan nga sulud sa Ore NPs sa normal nga mga organo nagpakita sa una nga oras sa obserbasyon (4 h), samtang ang labing kadaghan nga sulud gitino sa mga tisyu sa tumor 8 ka oras pagkahuman sa pag-injection, posible tungod sa Ore NPs.EPR epekto sa LF.Sumala sa mga resulta sa pag-apod-apod, ang kamalaumon nga gidugayon sa pagtambal sa NP ore gikuha 8 ka oras pagkahuman sa administrasyon.Aron ihulagway ang proseso sa pagtipon sa RuDA-NPs sa mga tumor site, ang photoacoustic (PA) nga mga kabtangan sa RuDA-NPs gimonitor pinaagi sa pagrekord sa PA signal sa RuDA-NPs sa lain-laing mga panahon human sa indeyksiyon.Una, ang signal sa PA sa RuDA-NP sa vivo gisusi pinaagi sa pagrekord sa mga imahe sa PA sa usa ka tumor site pagkahuman sa intratumoral injection sa RuDA-NP.Ingon sa gipakita sa Supplementary Figure 30, RuDA-NPs nagpakita sa usa ka lig-on nga PA signal, ug adunay usa ka positibo nga correlation tali sa RuDA-NP konsentrasyon ug PA signal intensity (Supplementary Figure 30A).Pagkahuman, sa vivo PA nga mga imahe sa mga site sa tumor ang natala pagkahuman sa intravenous injection sa RuDA ug RuDA-NP sa lainlaing mga punto sa oras pagkahuman sa indeyksiyon.Ingon sa gipakita sa Figure 7B, ang PA signal sa RuDA-NPs gikan sa tumor site anam-anam nga miuswag sa panahon ug nakaabot sa usa ka talampas sa 8 ka oras nga post-injection, nga nahiuyon sa mga resulta sa pag-apod-apod sa tisyu nga gitino sa pagtuki sa ICP-MS.Mahitungod sa RuDA (Supplementary Fig. 30B), ang pinakataas nga PA signal intensity nagpakita 4 ka oras human sa indeyksiyon, nga nagpakita sa usa ka paspas nga rate sa pagsulod sa RuDA ngadto sa tumor.Dugang pa, ang excretory nga kinaiya sa RuDA ug RuDA-NPs gisusi pinaagi sa pagtino sa gidaghanon sa ruthenium sa ihi ug feces gamit ang ICP-MS.Ang nag-unang ruta sa elimination alang sa RuDA (Supplementary Fig. 31) ug RuDA-NPs (Fig. 7C) mao ang pinaagi sa feces, ug epektibo nga clearance sa RuDA ug RuDA-NPs naobserbahan sa panahon sa 8-adlaw nga panahon sa pagtuon, nga nagpasabot nga ang RuDA ug ang RuDA-NPs mahimong epektibong mawagtang gikan sa lawas nga walay dugay nga pagkahilo.
A. Ang ex vivo nga pag-apod-apod sa RuDA-NP sa mga tisyu sa mouse gitino sa sulod sa Ru (porsiyento sa gidumala nga dosis sa Ru (ID) kada gramo sa tisyu) sa lain-laing mga panahon human sa indeyksiyon.Ang datos kay mean ± standard deviation (n = 3). Wala gipares, duha ka kilid nga t nga pagsulay *p <0.05, **p <0.01, ug ***p <0.001. Wala gipares, duha ka kilid nga t nga pagsulay *p <0.05, **p <0.01, ug ***p <0.001. Непарные двусторонние t-критерии *p <0,05, **p <0,01 ug ***p <0,001. Wala gipares nga two-tailed t-tests *p<0.05, **p<0.01, ug ***p<0.001.未配对的双边t 检验*p < 0.05、**p < 0.01 和***p < 0.001。未配对的双边t 检验*p < 0.05、**p < 0.01 和***p < 0.001。 Непарные двусторонние t-тесты *p <0,05, **p <0,01 ug ***p <0,001. Wala gipares nga two-tailed t-tests *p<0.05, **p<0.01, ug ***p<0.001.B PA nga mga hulagway sa in vivo tumor sites sa 808 nm excitation human sa intravenous administration sa RuDA-NPs (10 µmol kg-1) sa lain-laing mga punto sa oras.Pagkahuman sa intravenous nga administrasyon sa RuDA NPs (10 µmol kg-1), ang C Ru gipagawas gikan sa mga ilaga nga adunay ihi ug feces sa lainlaing mga agwat sa oras.Ang datos kay mean ± standard deviation (n = 3).
Ang kapasidad sa pagpainit sa RuDA-NP sa vivo gitun-an sa hubo nga mga ilaga nga adunay MDA-MB-231 ug RuDA nga mga tumor alang sa pagtandi.Ingon sa gipakita sa fig.8A ug supplementary Fig. 32, ang control (saline) nga grupo nagpakita sa dili kaayo pagbag-o sa temperatura (ΔT ≈ 3 °C) human sa 10 minutos nga padayon nga pagkaladlad.Bisan pa, ang temperatura sa RuDA-NPs ug RuDA paspas nga misaka nga adunay labing taas nga temperatura nga 55.2 ug 49.9 °C, matag usa, nga naghatag igong hyperthermia alang sa in vivo cancer therapy.Ang naobserbahan nga pagtaas sa taas nga temperatura alang sa RuDA NPs (ΔT ≈ 24 ° C) kumpara sa RuDA (ΔT ≈ 19 ° C) mahimong tungod sa mas maayo nga permeability ug akumulasyon sa mga tisyu sa tumor tungod sa epekto sa EPR.
Infrared thermal nga mga hulagway sa mga ilaga nga adunay MDA-MB-231 nga mga tumor nga gi-irradiated sa 808 nm laser sa lain-laing mga panahon 8 ka oras human sa indeyksiyon.Ang mga representatibo nga mga hulagway sa upat ka biolohikal nga pagbalik gikan sa matag grupo gipakita.B Relative tumor volume ug C Average tumor mass sa lain-laing grupo sa mga ilaga atol sa pagtambal.D Mga kurba sa gibug-aton sa lawas sa lain-laing grupo sa mga ilaga.Pag-irradiate sa laser nga adunay wavelength nga 808 nm nga adunay gahum nga 0.5 W/cm2 sulod sa 10 minutos (300 J/cm2).Error bars, mean ± standard deviation (n = 3). Wala gipares, duha ka kilid nga t nga pagsulay *p <0.05, **p <0.01, ug ***p <0.001. Wala gipares, duha ka kilid nga t nga pagsulay *p <0.05, **p <0.01, ug ***p <0.001. Непарные двусторонние t-критерии *p <0,05, **p <0,01 ug ***p <0,001. Wala gipares nga two-tailed t-tests *p<0.05, **p<0.01, ug ***p<0.001.未配对的双边t 检验*p < 0.05、**p < 0.01 和***p < 0.001。未配对的双边t 检验*p < 0.05、**p < 0.01 和***p < 0.001。 Непарные двусторонние t-тесты *p <0,05, **p <0,01 ug ***p <0,001. Wala gipares nga two-tailed t-tests *p<0.05, **p<0.01, ug ***p<0.001. E H&E nga nagmantsa nga mga hulagway sa dagkong mga organo ug mga tumor gikan sa lain-laing mga grupo sa pagtambal, lakip ang Saline, Saline + Laser, RuDA, RuDA + Laser, RuDA-NPs, ug RuDA-NPs + Laser nga mga grupo. E H&E nga nagmantsa nga mga hulagway sa dagkong mga organo ug mga tumor gikan sa lain-laing mga grupo sa pagtambal, lakip ang Saline, Saline + Laser, RuDA, RuDA + Laser, RuDA-NPs, ug RuDA-NPs + Laser nga mga grupo. Изображения окрашивания E H&E основных органов и опухолей из разных групп лечения, включая группы физиологического раствора, физиологического раствора + лазера, RuDA, RuDA + Laser, RuDA-NPs и RuDA-NPs + Laser. E H&E nga nagmantsa nga mga hulagway sa dagkong mga organo ug mga tumor gikan sa lain-laing mga grupo sa pagtambal, lakip ang saline, saline + laser, RuDA, RuDA + Laser, RuDA-NPs, ug RuDA-NPs + Laser nga mga grupo.来自不同治疗组的主要器官和肿瘤的E H&E 染色图像，包括盐水、盐水+ 激光、家光、Rus Ru来自不同治疗组的主要器官和肿瘤的E H&E Окрашивание E H&E основных органов и опухолей из различных групп лечения, включая физиологический раствор, физиологический раствор + лазер, RuDA, RuDA + лазер, RuDA-NPs и RuDA-NPs + лазер. E H&E pagmantsa sa dagkong mga organo ug mga tumor gikan sa lain-laing mga grupo sa pagtambal lakip na ang saline, saline + laser, RuDA, RuDA + laser, RuDA-NPs, ug RuDA-NPs + laser.Scale bar: 60 µm.
Ang epekto sa phototherapy sa vivo uban sa RuDA ug RuDA NPs gisusi diin ang hubo nga mga ilaga nga adunay MDA-MB-231 nga mga tumor gi-injected sa intravenously sa RuDA o RuDA NPs sa usa ka dosis nga 10.0 µmol kg-1 pinaagi sa tail vein, ug dayon 8 mga oras human sa indeyksiyon.laser irradiation nga adunay wavelength nga 808 nm.Ingon sa gipakita sa Figure 8B, ang mga volume sa tumor labi nga nadugangan sa mga grupo sa saline ug laser, nga nagpakita nga ang saline o laser 808 nga pag-iilaw adunay gamay nga epekto sa pagtubo sa tumor.Sama sa saline nga grupo, ang paspas nga pagtubo sa tumor nakita usab sa mga ilaga nga gitambalan sa RuDA-NPs o RuDA sa pagkawala sa laser irradiation, nga nagpakita sa ilang ubos nga itom nga toxicity.Sa kasukwahi, human sa laser irradiation, ang RuDA-NP ug RuDA nga pagtambal nag-aghat sa mahinungdanon nga pagbag-o sa tumor nga adunay pagkunhod sa gidaghanon sa tumor nga 95.2% ug 84.3%, matag usa, kon itandi sa saline treated nga grupo, nga nagpakita sa maayo kaayo nga synergistic PDT., gipataliwala sa epekto sa RuDA/CHTV.– NP o Ore Kon itandi sa RuDA, RuDA NPs nagpakita sa usa ka mas maayo nga phototherapeutic epekto, nga nag-una tungod sa EPR epekto sa RuDA NPs.Ang mga resulta sa pagpugong sa pagtubo sa tumor dugang nga gisusi pinaagi sa gibug-aton sa tumor nga gikuha sa adlaw nga 15 sa pagtambal (Fig. 8C ug Supplementary Fig. 33).Ang gipasabot nga tumor mass sa RuDA-NP nga gitambalan nga mga ilaga ug ang RuDA nga gitambalan nga mga ilaga mao ang 0.08 ug 0.27 g, matag usa, nga mas gaan kay sa control group (1.43 g).
Dugang pa, ang gibug-aton sa lawas sa mga ilaga girekord matag tulo ka adlaw aron tun-an ang mangitngit nga toxicity sa RuDA-NPs o RuDA sa vivo.Sama sa gipakita sa Figure 8D, walay mahinungdanong kalainan sa gibug-aton sa lawas ang naobserbahan alang sa tanang grupo sa pagtambal. Dugang pa, ang pagmantsa sa hematoxylin ug eosin (H&E) sa mga mayor nga organo (kasingkasing, atay, spleen, baga, ug kidney) gikan sa lainlaing mga grupo sa pagtambal gihimo. Dugang pa, ang pagmantsa sa hematoxylin ug eosin (H&E) sa mga mayor nga organo (kasingkasing, atay, spleen, baga, ug kidney) gikan sa lainlaing mga grupo sa pagtambal gihimo. Кроме того, было проведено окрашивание гематоксилином и эозином (H&E) основных органов (сердца, печени, гиплени) Dugang pa, gihimo ang pagmantsa sa hematoxylin ug eosin (H&E) sa dagkong mga organo (kasingkasing, atay, spleen, baga, ug kidney) gikan sa lainlaing grupo sa pagtambal.此外，对不同治疗组的主要器官（心脏、肝脏、脾脏、肺和肾脏）进行苏有石行苏撨。 (H&E) Кроме того, проводили окрашивание гематоксилином и эозином (H&E) основных органов (сердца, печени, селехленкоч) Dugang pa, ang pagmantsa sa hematoxylin ug eosin (H&E) sa mga dagkong organo (kasingkasing, atay, spleen, baga, ug kidney) gihimo sa lainlaing mga grupo sa pagtambal.Ingon sa gipakita sa Fig.8E, ang H&E nga nagmantsa nga mga hulagway sa lima ka dagkong organo gikan sa RuDA-NPs ug RuDA nga mga grupo wala magpakitag dayag nga abnormalidad o kadaot sa organo. 8E, ang H&E nga nagmantsa nga mga hulagway sa lima ka dagkong organo gikan sa RuDA-NPs ug RuDA nga mga grupo wala magpakitag dayag nga abnormalidad o kadaot sa organo.Ingon sa gipakita sa fig.8E, изображения окрашивания H&E пяти основных органов из групп RuDA-NPs ug RuDA walay демонстрируют явных аномаливиновил. 8E, H&E staining nga mga hulagway sa lima ka dagkong organo gikan sa RuDA-NPs ug RuDA nga mga grupo wala magpakitag dayag nga mga abnormalidad sa organo o mga samad.如图8E 所示，来自RuDA-NPs 和RuDA 组的五个主要器官的H&E 染色图像没有显示出明显的家出明显的图片。如图8E 所示，来自RuDA-NPs 和RuDA 组的五个主要器官的H&E Как показано на рисунке 8E, изображения окрашивания H&E пяти основных органов из групп RuDA-NPs и RuDA wala nay katungod sa pag-ilis. Sama sa gipakita sa Figure 8E, ang H&E nga nagmantsa nga mga hulagway sa lima ka dagkong organo gikan sa RuDA-NPs ug RuDA nga mga grupo wala magpakitag dayag nga abnormalidad o kadaot sa organo.Kini nga mga resulta nagpakita nga ang RuDA-NP o ang RuDA wala nagpakita mga timailhan sa toxicity sa vivo. Dugang pa, ang H&E staining nga mga imahe sa mga tumor nagpakita nga ang RuDA + Laser ug RuDA-NPs + Laser nga mga grupo mahimong hinungdan sa grabe nga pagkaguba sa selula sa kanser, nga nagpakita sa maayo kaayo nga in vivo phototherapeutic nga pagkaepektibo sa RuDA ug RuDA-NPs. Dugang pa, ang H&E staining nga mga imahe sa mga tumor nagpakita nga ang RuDA + Laser ug RuDA-NPs + Laser nga mga grupo mahimong hinungdan sa grabe nga pagkaguba sa selula sa kanser, nga nagpakita sa maayo kaayo nga in vivo phototherapeutic nga pagkaepektibo sa RuDA ug RuDA-NPs.Dugang pa, ang hematoxylin-eosin stained tumor nga mga hulagway nagpakita nga ang RuDA + Laser ug RuDA-NPs + Laser nga mga grupo makapahinabog grabeng pagkaguba sa mga selula sa kanser, nga nagpakita sa labaw nga phototherapeutic nga pagka-epektibo sa RuDA ug RuDA-NPs sa vivo.H&E此外 ， 肿瘤 的 & e 染色 显示 ， ruda + laser 和 ruda-nps + laser 组均 导致 的 癌细胞 破坏 ， 证明 的。。 ruda 的。。 ruda 。 ...Dugang pa, ang hematoxylin ug eosin stained tumor nga mga imahe nagpakita nga ang RuDA + Laser ug RuDA-NPs + Laser nga mga grupo miresulta sa grabe nga pagkaguba sa mga selula sa kanser, nga nagpakita sa labaw nga phototherapeutic nga pagka-epektibo sa RuDA ug RuDA-NPs sa vivo.
Sa konklusyon, ang Ru (II) -arene (RuDA) organometallic complex nga adunay DA-type nga ligand gidisenyo aron mapadali ang proseso sa ISC gamit ang aggregation method.Ang Synthesized RuDA mahimong mag-self-assemble pinaagi sa non-covalent interactions aron maporma ang RuDA-derived supramolecular systems, sa ingon mapadali ang 1O2 formation ug episyente nga photothermal conversion alang sa light-induced cancer therapy.Mamatikdan nga ang monomeric RuDA wala makamugna og 1O2 ubos sa laser irradiation sa 808 nm, apan makamugna og dako nga kantidad sa 1O2 sa aggregated state, nga nagpakita sa rationality ug efficiency sa among design.Gipakita sa sunod nga mga pagtuon nga ang supramolecular nga asembliya naghatag sa RuDA og gipaayo nga photophysical ug photochemical nga mga kabtangan, sama sa redshift absorption ug photobleaching resistance, nga maayo kaayo alang sa pagproseso sa PDT ug PTT.Ang duha nga in vitro ug in vivo nga mga eksperimento nagpakita nga ang RuDA NPs nga adunay maayo nga biocompatibility ug maayo nga akumulasyon sa tumor nagpakita sa maayo kaayo nga kalihokan sa anticancer nga gipahinabo sa kahayag sa laser irradiation sa wavelength nga 808 nm.Sa ingon, ang RuDA NPs isip epektibo nga bimodal supramolecular PDT/PTW reagents makapauswag sa set sa mga photosensitizer nga gi-activate sa wavelength nga labaw sa 800 nm.Ang konsepto nga disenyo sa supramolecular system naghatag ug usa ka episyente nga ruta alang sa NIR-activated photosensitizers nga adunay maayo kaayo nga photosensitizing effect.
Ang tanan nga mga kemikal ug mga solvent nakuha gikan sa komersyal nga mga supplier ug gigamit nga wala’y dugang nga pagputli.Ang RuCl3 gipalit gikan sa Boren Precious Metals Co., Ltd. (Kunming, China).[(η6-p-cym)Ru(fendio)Cl]Cl (fendio = 1,10-phenanthroline-5,6-dione) ug 4,7-bis[4-(N,N-diphenylamino)phenyl]-5 ,6-Diamino-2,1,3-benzothiadiazole gi-synthesize sumala sa miaging mga pagtuon64,65.Ang NMR spectra natala sa Bruker Avance III-HD 600 MHz spectrometer sa Southeastern University Analytical Test Center gamit ang d6-DMSO o CDCl3 isip solvent.Ang kemikal nga pagbalhin δ gihatag sa ppm.may kalabotan sa tetramethylsilane, ug ang mga panagsama sa interaksyon nga J gihatag sa hingpit nga mga kantidad sa hertz.Ang taas nga resolusyon sa mass spectrometry (HRMS) gihimo sa usa ka Agilent 6224 ESI / TOF MS nga instrumento.Ang pagtuki sa elemento sa C, H, ug N gihimo sa usa ka Vario MICROCHNOS elemental analyzer (Elementar).Ang UV-visible spectra gisukod sa Shimadzu UV3600 spectrophotometer.Ang fluorescence spectra natala sa usa ka Shimadzu RF-6000 spectrofluorimeter.Ang EPR spectra natala sa usa ka instrumento sa Bruker EMXmicro-6/1.Ang morpolohiya ug istruktura sa giandam nga mga sample gitun-an sa FEI Tecnai G20 (TEM) ug Bruker Icon (AFM) nga mga instrumento nga naglihok sa boltahe nga 200 kV.Dynamic light scattering (DLS) gihimo sa usa ka Nanobrook Omni analyzer (Brookhaven).Ang mga kabtangan sa photoelectrochemical gisukod sa usa ka electrochemical setup (CHI-660, China).Ang mga hulagway sa photoacoustic nakuha gamit ang FUJIFILM VisualSonics Vevo® LAZR system.Ang confocal nga mga hulagway nakuha gamit ang Olympus FV3000 confocal microscope.Ang pag-analisar sa FACS gihimo sa usa ka BD Calibur flow cytometer.Ang high performance liquid chromatography (HPLC) nga mga eksperimento gihimo sa Waters Alliance e2695 system gamit ang 2489 UV/Vis detector.Ang mga pagsulay sa Gel Permeation Chromatography (GPC) natala sa usa ka Thermo ULTIMATE 3000 nga instrumento gamit ang usa ka ERC RefratoMax520 refractive index detector.
[(η6-p-cym)Ru(fendio)Cl]Cl (fendio = 1,10-phenanthroline-5,6-dione)64 (481.0 mg, 1.0 mmol), 4,7-bis[4 -(N, N-diphenylamino)phenyl]-5,6-diamino-2,1,3-benzothiadiazole 65 (652.0 mg, 1.0 mmol) ug glacial acetic acid (30 mL) gikutaw sa reflux refrigerator sulod sa 12 ka oras.Dayon ang solvent gikuha sa vacuo gamit ang rotary evaporator.Ang resulta nga residue giputli pinaagi sa flash column chromatography (silica gel, CH2Cl2: MeOH = 20: 1) aron makuha ang RuDA isip usa ka green nga powder (ani: 877.5 mg, 80%).anus.Gikalkulo para sa C64H48Cl2N8RuS: C 67.84, H 4.27, N 9.89.Nakit-an: C 67.92, H 4.26, N 9.82.1H NMR (600 MHz, d6-DMSO) δ 10.04 (s, 2H), 8.98 (s, 2H), 8.15 (s, 2H), 7.79 (s, 4H), 7.44 (s, 8H), 7.21 (d, J = 31.2 Hz, 16H), 6.47 (s, 2H), 6.24 (s, 2H), 2.69 (s, 1H), 2 .25 (s, 3H), 0.99 (s, 6H).13c nmr (150 MHZ, D6-DMSO), δ (PPM) 158.03, 152.81, 149.31, 147.98, 147.16, 139.98, 136.21, 135.57, 134.68, 130.34, 130.02, 128.68, 128.01, 125.51, 124.45, 120.81, 103.49, 103.49 , 103. , 86.52, 84.75, 63.29, 30.90, 22.29, 18.83.ESI-MS: m/z [M-Cl]+ = 1097.25.
Synthesis sa 4,7-bis[4-(N,N-diethylamino)phenyl-5,6-diamino-2,1,3-benzothiadiazole (L2): L2 gi-synthesize sa duha ka mga lakang.Ang Pd(PPh3)4 (46 mg, 0.040 mmol) gidugang sa N,N-diethyl-4-(tributylstannyl)aniline (1.05 g, 2.4 mmol) ug 4,7-dibromo-5,6-dinitro solution - 2, 1,3-benzothiadiazole (0.38 g, 1.0 mmol) sa uga nga toluene (100 ml).Ang sagol nga gikutaw sa 100 ° C sulod sa 24 ka oras.Human makuha ang toluene sa vacuo, ang resulta nga solid gihugasan sa petroleum ether.Dayon ang usa ka sagol niini nga compound (234.0 mg, 0.45 mmol) ug iron powder (0.30 g, 5.4 mmol) sa acetic acid (20 ml) gikutaw sa 80 ° C. sulod sa 4 ka oras.Ang sagol nga reaksyon gibubo sa tubig ug ang resulta nga brown nga solid nakolekta pinaagi sa pagsala.Ang produkto giputli sa makaduha pinaagi sa vacuum sublimation sa paghatag sa usa ka green nga solid (126.2 mg, 57% ani).anus.Gikalkulo para sa C26H32N6S: C 67.79, H 7.00, N 18.24.Nakit-an: C 67.84, H 6.95, H 18.16.1H NMR (600 MHz, CDCl3), δ (ppm) 7.42 (d, 4H), 6.84 (d, 4H), 4.09 (s, 4H), 3.42 (d, 8H ), 1.22 (s, 12H).13С NMR (150 MHz, CDCl3), δ (ppm) 151.77, 147.39, 138.07, 131.20, 121.09, 113.84, 111.90, 44.34, 12.77.ESI-MS: m/z [M+H]+ = 461.24.
Ang mga compound giandam ug giputli subay sa mga pamaagi nga susama sa RuDA.anus.Gikalkulo para sa C48H48Cl2N8RuS: C 61.27, H 5.14, N 11.91.Nakit-an: C, 61.32, H, 5.12, N, 11.81,1H NMR (600 MHz, d6-DMSO), δ (ppm) 10.19 (s, 2H), 9.28 (s, 2H), 8.09 (s, 2H), 7.95 (s, 4H), 6.93 (s, 4H), 6.48 (d, 2H), 6.34 (s, 2H), 3.54 (t, 8H), 2.80 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 1.31 (t, 12H), 1.07 (s, 6H).13c nmr (151 mhz, CDCL3), δ (PPM) 158.20, 153.36, 148.82, 148.14, 138.59, 136.79, 135.75, 134.71, 130.44, 128.87, 128.35, 121.70, 111.84, 110.76, 105.07, 104.23, 87.0, 84.4., 38.06, 31.22, 29.69, 22.29, 19.19, 14.98, 12.93.ESI-MS: m/z [M-Cl]+ = 905.24.
Ang RuDA natunaw sa MeOH / H2O (5/95, v / v) sa konsentrasyon nga 10 μM.Ang pagsuyup spectrum sa RuDA gisukod matag 5 minuto sa usa ka Shimadzu UV-3600 spectrophotometer ubos sa irradiation sa laser kahayag uban sa usa ka wavelength sa 808 nm (0.5 W/cm2).Ang ICG spectra natala ubos sa sama nga mga kondisyon sama sa sumbanan.
Ang EPR spectra natala sa usa ka Bruker EMXmicro-6/1 spectrometer nga adunay microwave power nga 20 mW, usa ka scanning range nga 100 G, ug usa ka field modulation sa 1 G. 2,2,6,6-tetramethyl-4-piperidone (TEMP) ug 5,5-dimethyl-1-pyrroline N-oxide (DMPO) gigamit isip spin traps.Ang electron spin resonance spectra natala alang sa nagkasagol nga solusyon sa RuDA (50 µM) ug TEMF (20 mM) o DMPO (20 mM) ubos sa aksyon sa laser radiation nga adunay wavelength nga 808 nm (0.5 W/cm2).
Ang mga kalkulasyon sa DFT ug TD-DFT alang sa RuDA gihimo sa PBE1PBE/6-31 G*//LanL2DZ nga lebel sa tubigon nga solusyon gamit ang Gaussian program 1666,67,68.Ang HOMO-LUMO, hole ug electron distributions sa low-energy singlet excited state RuDA giplano gamit ang GaussView nga programa (bersyon 5.0).
Una namong gisulayan ang pagsukod sa generation efficiency sa 1O2 RuDA gamit ang conventional UV-visible spectroscopy nga adunay ICG (ΦΔ = 0.002) isip usa ka sumbanan, apan ang photodegradation sa ICG kusog nga nakaapekto sa mga resulta.Sa ingon, ang quantum yield sa 1O2 RuDA gisukod pinaagi sa pag-ila sa usa ka pagbag-o sa intensity sa ABDA fluorescence sa mga 428 nm kung gi-irradiated sa usa ka laser nga adunay wavelength nga 808 nm (0.5 W / cm2).Ang mga eksperimento gihimo sa RuDA ug RuDA NPs (20 μM) sa tubig / DMF (98/2, v / v) nga adunay ABDA (50 μM).Ang quantum yield sa 1O2 gikalkulo gamit ang mosunod nga pormula: ΦΔ (PS) = ΦΔ (ICG) × (rFS/APS)/(rICG/AICG).Ang rPS ug rICG mao ang mga rate sa reaksyon sa ABDA nga adunay 1O2 nga nakuha gikan sa photosensitizer ug ICG, matag usa.Ang APS ug AICG mao ang pagsuyop sa photosensitizer ug ICG sa 808 nm, matag usa.
Ang mga pagsukod sa AFM gihimo sa mga kondisyon sa likido gamit ang scan mode sa usa ka Bruker Dimension Icon AFM system.Gamit ang usa ka bukas nga istruktura nga adunay likido nga mga selyula, ang mga selyula gihugasan kaduha sa ethanol ug gipauga sa usa ka sapa nga nitroheno.Isulod ang uga nga mga selula sa optical head sa mikroskopyo.Diha-diha dayon ibutang ang usa ka tinulo sa sample ngadto sa pool sa likido ug ibutang kini sa cantilever gamit ang usa ka sterile disposable plastic syringe ug usa ka sterile nga dagom.Ang laing tinulo direkta nga gibutang sa sample, ug sa dihang ang optical head ipaubos, ang duha ka tulo maghiusa, nga mahimong usa ka meniscus tali sa sample ug sa liquid reservoir.Ang mga pagsukod sa AFM gihimo gamit ang SCANASYST-FLUID V-shaped nitride cantilever (Bruker, hardness k = 0.7 N m-1, f0 = 120-180 kHz).
Ang HPLC chromatograms nakuha sa Waters e2695 system nga adunay phoenix C18 column (250×4.6 mm, 5 µm) gamit ang 2489 UV/Vis detector.Ang wavelength sa detector mao ang 650 nm.Ang mga mobile phase A ug B mao ang tubig ug methanol, matag usa, ug ang mobile phase flow rate mao ang 1.0 ml·min-1.Ang gradient (solvent B) mao ang mosunod: 100% gikan sa 0 ngadto sa 4 minutos, 100% ngadto sa 50% gikan sa 5 ngadto sa 30 minutos, ug i-reset ngadto sa 100% gikan sa 31 ngadto sa 40 minutos.Ang ore natunaw sa usa ka sinagol nga solusyon sa methanol ug tubig (50/50, sa gidaghanon) sa konsentrasyon nga 50 μM.Ang gidaghanon sa indeyksiyon mao ang 20 μl.
Ang GPC assays natala sa usa ka Thermo ULTIMATE 3000 nga instrumento nga adunay duha ka PL aquagel-OH MIXED-H nga mga kolum (2 × 300 × 7.5 mm, 8 µm) ug usa ka ERC RefratoMax520 refractive index detector.Ang kolum sa GPC gi-eluted sa tubig sa rate sa pag-agos nga 1 ml / min sa 30 ° C.Ang Ore NPs natunaw sa solusyon sa PBS (pH = 7.4, 50 μM), ang gidaghanon sa indeyksiyon mao ang 20 μL.
Ang mga photocurrents gisukod sa usa ka electrochemical setup (CHI-660B, China).Ang optoelectronic nga mga tubag sa dihang ang laser gipalong ug gipalong (808 nm, 0.5 W / cm2) gisukod sa boltahe nga 0.5 V sa usa ka itom nga kahon, matag usa.Usa ka standard nga tulo ka electrode cell gigamit sa usa ka L-shaped glassy carbon electrode (GCE) isip working electrode, standard calomel electrode (SCE) isip reference electrode, ug platinum disk isip counter electrode.Usa ka 0.1 M Na2SO4 nga solusyon ang gigamit isip usa ka electrolyte.
Ang linya sa selula sa kanser sa suso sa tawo nga MDA-MB-231 gipalit gikan sa KeyGEN Biotec Co., LTD (Nanjing, China, numero sa katalogo: KG033).Ang mga selula gipatubo sa mga monolayer sa Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM, taas nga glucose) nga gidugangan sa solusyon sa 10% fetal bovine serum (FBS), penicillin (100 μg/ml) ug streptomycin (100 μg/ml).Ang tanan nga mga selula gi-kultura sa 37 ° C sa usa ka humid nga atmospera nga adunay 5% CO2.
Ang MTT assay gigamit aron mahibal-an ang cytotoxicity sa RuDA ug RuDA-NPs sa presensya ug pagkawala sa light irradiation, nga adunay o wala ang Vc (0.5 mM).Ang mga selula sa kanser sa MDA-MB-231 gipatubo sa 96-well nga mga plato sa usa ka densidad sa selula nga gibana-bana nga 1 x 105 nga mga selula / ml / atabay ug gilumlum sulod sa 12 ka oras sa 37.0 ° C sa atmospera nga 5% CO2 ug 95% nga hangin.Ang RuDA ug RuDA NPs nga natunaw sa tubig gidugang sa mga selyula.Human sa 12 ka oras nga paglumlum, ang mga selula naladlad sa 0.5 W cm -2 laser radiation sa wavelength nga 808 nm sulod sa 10 minutos (300 J cm -2) ug dayon gilumlom sa ngitngit sulod sa 24 ka oras.Ang mga selula dayon gilumlom sa MTT (5 mg / ml) alang sa laing 5 ka oras.Sa katapusan, usba ang medium sa DMSO (200 µl) aron matunaw ang resulta nga purpura nga mga kristal nga formazan.Ang mga kantidad sa OD gisukod gamit ang usa ka microplate reader nga adunay wavelength nga 570/630 nm.Ang bili sa IC50 alang sa matag sample gikalkulo gamit ang SPSS software gikan sa dose-response curves nga nakuha gikan sa labing menos tulo ka independenteng mga eksperimento.
Ang mga selula sa MDA-MB-231 gitambalan sa RuDA ug RuDA-NP sa konsentrasyon nga 50 μM.Pagkahuman sa 12 ka oras nga paglumlum, ang mga selyula gi-irradiated sa usa ka laser nga adunay wavelength nga 808 nm ug gahum nga 0.5 W / cm2 sa 10 min (300 J / cm2).Sa grupo sa bitamina C (Vc), ang mga selula gitambalan sa 0.5 mM Vc sa wala pa ang laser irradiation.Ang mga selula dayon gilumlom sa kangitngit alang sa dugang nga 24 ka oras, dayon gimantsa sa calcein AM ug propidium iodide (20 μg / ml, 5 μl) sulod sa 30 minutos, dayon gihugasan sa PBS (10 μl, pH 7.4).mga larawan sa namansahan nga mga selula.
Oras sa pag-post: Sep-23-2022
